mRNA-EP制备的肿瘤血管靶向CAR-T细胞用于临床研究的免疫学质量和性能

Kanako Inoo , Ryo Inagaki , Kento Fujiwara , Shigemi Sasawatari , Takashi Kamigaki , Shinsaku Nakagawa , Naoki Okada

摘要：

我们先前报道了用血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)特异性嵌合抗原受体(CAR)基因工程。改造的肿瘤血管重定向T细胞在各种鼠实体瘤模型中表现出显著的抗肿瘤作用。在本研究中，我们通过CAR编码mRNA电穿孔(mRNA-EP)制备了抗VEGFR2 CAR-T细胞，并分析了其免疫学特征和功能，用于临床研究。在mRNA-EP后6-12小时达到峰值后，检测到鼠和人T细胞上抗VEGFR2 CAR的表达，效率约为100%，持续数天。将鼠抗VEGFR2 CAR-T细胞三重转移至B16BL6荷瘤小鼠中，结果证明其抗肿瘤作用与用逆转录病毒载体改造的CAR-T细胞单次转移的抗肿瘤作用相当。通过活力、生长和表型参数确定，mRNA-EP未对人T细胞特征造成任何损伤或缺陷。此外，表达不同CAR构建体的两种人抗VEGFR2 CAR-T细胞以抗原特异性方式分化为效应期，具有细胞因子分泌和细胞毒活性。这些结果表明，我们通过mRNA-EP制备的抗VEGFR2 CAR-T细胞在质量和性能方面具有潜力，为作为细胞医学的临床研究提供安全性和有效性的前景。